體外診斷試劑主要原材料研究注冊審查指導原則（2024年第1號）

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體外診斷試劑主要原材料研究
注冊審查指導原則

體外診斷試劑主要原材料是試劑的主要組成部分，是體外診斷試劑質量水平的重要決定因素，影響著體外診斷試劑靈敏度、特異性、精密度、穩定性等各項性能?？茖W合理地開展產品的主要原材料研究，確定原材料的質量標準，是產品設計開發的關鍵過程。本指導原則旨在指導注冊申請人對體外診斷試劑主要原材料進行充分的研究，并整理形成注冊申報資料，同時也為技術審評部門審評注冊申報資料提供參考。

本指導原則是對體外診斷試劑主要原材料的一般要求，申請人應依據產品的具體特性確定其中內容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應的科學依據，并依據產品的具體特性對注冊申報資料的內容進行充實和細化。

本指導原則是供注冊申請人和技術審評人員使用的指導性文件，但不包括審評審批所涉及的行政事項，亦不作為法規強制執行，應在遵循相關法規的前提下使用本指導原則。如果有能夠滿足相關法規要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細的研究資料和驗證資料。

本指導原則是在現行法規、標準體系及當前認知水平下制定的，隨著法規、標準的不斷完善和科學技術的不斷發展，本指導原則相關內容也將適時進行調整。

一、適用范圍

體外診斷試劑的構成中包括多種生物學和物理化學原材料，類型豐富，性能多樣，各種原材料共同決定了體外診斷試劑的質量。其中部分原材料對于試劑性能至關重要，是反應體系的主要構成部分，具有生物活性或物理化學特性，生產工藝要求較高，需要嚴格的質量控制，這些原材料被稱為體外診斷試劑的主要原材料，主要包括以下內容：

（一）核心反應體系原材料

1.與被測物直接反應的生物活性材料

與被測物直接結合的抗原、抗體。

引物，探針，dNTP，DNA聚合酶、逆轉錄酶等直接參與核酸檢測反應的酶。

生化檢測中與被測物反應的底物、酶和輔酶等。

血型檢測用抗體、紅細胞，凝血檢測用血漿、激活劑等。

2.免疫競爭法原理試劑的被測物類似物

嗎啡-BSA結合物、甲基安非他明抗原，乙型肝炎病毒核心抗體等。

3.校準品中的陽性材料

校準品中含有的被測物材料，質譜產品中的標準品等。

4.其他

刺激用病原體抗原，創新型原材料等。

（二）反應體系中其他生物活性材料

1.與一抗試劑結合的二抗

免疫組化類產品的抗小鼠/兔IgG抗體等。

2.檢測信號產生所需的酶

免疫檢測類產品的辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等。

3.針對性去除干擾相關的生物活性材料

抗紅細胞抗體、人抗鼠抗體（HAMA）阻斷劑、IgG抗體阻斷劑、抗生物素抗體、UDG酶，RNase抑制劑等。

背景信號封閉劑，例如封閉非特異擴增的野生型引物，人Cot-1 DNA。

4.起連接作用的生物活性材料

生物素和鏈霉親和素，熒光素和抗熒光素抗體等。

5.其他

蛋白酶K等。

（三）固相載體

1.免疫檢測用硝酸纖維素膜、磁微粒、微孔板等。

2.血型檢測用凝膠、玻璃珠

3.微流控載體

微流控芯片等。

（四）信號物質

1.顯色、比濁物質

膠體金、乳膠等。

2.發光物質

熒光素/熒光微球/熒光染料、吖啶酯、三聯吡啶釕等。

3.凝集法檢測試劑用紅細胞（非血型檢測用）、明膠粒子

（五）質控品和內標中的生物活性材料

1.含有特異性核酸片段的材料

含靶核酸片段、內標片段的基因組DNA、細胞、菌株、病毒、假病毒、質粒等。

內標引物、探針。

2.含有抗原、抗體被測物的材料

天然/重組抗原、抗體，陽性樣本、動物血清、菌株、病毒等。

3.含有生化檢測被測物的材料

陽性血清、重組酶等。

4.免疫層析質控線材料

膠體金法產品的質控抗體等。

5.其他

陽性對照用刺激物，例如：植物血凝素。

備注1：如果原材料以包含核心反應體系原材料的連接物、混合物等形式存在，則按照核心反應體系原材料的要求提交適用的資料。

備注2：上述具體主要原材料僅為舉例，并非窮舉。體外診斷試劑的被測物和方法學較多，對于本文未涵蓋的原材料，請參照上述內容進行類型劃分。

《關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》中要求第三類體外診斷試劑注冊申報時需要提交主要原材料的研究資料，管理類別為第二類的產品注冊申報時無需提交主要原材料研究資料，由申請人保存，技術審評需要時提交。本指導原則主要針對第三類體外診斷試劑進行闡述。

本指導原則主要描述體外診斷試劑主要原材料的通用要求，如申報產品已有針對性的具體指導原則，應同時參照相應產品的指導原則進行。

本指導原則適用于體外診斷試劑，產品分類編碼為6840。

本指導原則適用于進行相關產品注冊和變更注冊的主要原材料研究，包括申報資料中的部分要求，其他未盡事宜，應當符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》等相關法規的要求。

二、注冊審查要點

（一）主要原材料的選擇與來源

在產品設計開發的初期，需要根據產品的設計需求及性能指標要求，結合原材料基本信息、參數指標及供應來源等因素綜合分析并驗證，確定最適的原材料來源。

提交核心反應體系原材料的選擇過程，包括理論分析和試驗驗證。理論分析是指從理論層面分析，為了實現產品的靈敏度、特異性、包容性等性能，需要采用哪些抗原檢測病原體抗體，要針對哪個靶基因設計引物探針等，可對多個原材料進行對比分析。試驗驗證一般是根據設計要求，對選擇的多個原材料進行篩選試驗，進行原材料的最終選定。對于客觀上僅有單一來源的原材料，或者參考采用申請人已上市前代產品或同類產品的部分原材料的情況，可免于進行篩選試驗，直接對原材料進行驗證。

試驗驗證建議盡量全面，包括原材料指標的驗證（例如：濃度、純度、效價等）和功能性驗證（例如：靈敏度、特異性、精密度、準確度、線性、穩定性等），具體驗證內容和方案由申請人根據產品適用性進行確定。對于可能存在批間差異的原材料，建議采用多批原材料進行驗證，以篩選出批間一致性較好的原材料。在原材料選擇階段，建議針對影響試劑性能的原材料指標進行全面的試驗驗證。如果涉及不具備的儀器或操作方法，可以委托其他單位完成。對于功能性驗證，需要采用多個具有代表性的真實樣本進行試驗，在此基礎上，對于部分罕見樣本，可采用培養物、細胞系等模擬樣本。

對于除核心反應體系原材料之外的其他主要原材料，可免于提交選擇過程，直接提交選擇后的驗證資料。

明確最終選定原材料的名稱、來源（申請人自制/外購及生產商名稱）和基本信息（例如：生物學來源，單克隆/多克隆，單克隆抗體克隆號/多克隆抗體免疫刺激原，天然抗原/重組抗原及表達載體，擴增基因座位/位點名稱,片段大小，序列信息，制備及鑒定方法、過程等）。如果源于外購，還需要提交原材料生產商出具的質量分析證書（COA）。針對引物、探針等自行設計，并委托其他生產商合成的原材料，需提供自行設計的相關資料和生產商出具的COA。

如果上述內容涉及原材料生產商的技術保密資料，鼓勵申請人協助原材料生產商按要求進行主文檔登記。

（二）主要原材料的質量標準

在主要原材料的選擇、驗證基礎上，明確原材料的主要指標，并考慮試驗方法的可行性，進一步形成主要原材料的質量標準，作為原材料到貨后驗收的依據。在制定質量標準時建議遵循以下幾點：

1.主要原材料的質量標準應包括客觀評價指標和相應的試驗方法。

2.核心反應體系原材料的客觀評價指標應至少包括原材料本身的主要指標和功能性指標。

3.不同種類的主要原材料質量標準差異較大，難以統一表述。需要申請人根據原材料及產品的特性，制定科學合理的質量標準。例如，抗體的質量標準可包括外觀、蛋白濃度、純度、分子量、效價及功能性實驗等；核酸檢測用酶的質量標準可包括酶活性（如DNA聚合或逆轉錄活性，內切或外切酶活性），擴增中的熱穩定性要求（如94℃保溫1小時后仍保持50%活性），相關的功能單位指標等；人源或其他生物源性原材料質量標準可包括濃度和生物安全性指標。

提供申請人按照質量標準對原材料進行入廠檢驗（外購）/放行檢驗（自制）的報告。

（三）企業參考品

體外診斷試劑生產企業一般會建立一套內部參考品，用于產品的設計開發及原材料與產品的質量控制。根據產品的具體情況及評價需求設計企業參考品，可包括陽性參考品/準確性參考品、陰性參考品/特異性參考品、檢出限參考品、重復性參考品、線性參考品等。在申報資料中提交企業參考品的研究資料，包括原料來源、組成、制備、陰陽性和/或量值確定等。

如果申請人未建立企業參考品，而是根據質量管理體系采用其他方式進行產品的設計開發及原材料、產品的質量控制，需要詳細說明，并確保合理性。

（四）產品技術要求附錄中主要原材料的內容

根據《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》的規定，第三類體外診斷試劑的產品技術要求中應當以附錄形式明確主要原材料。

對于核心反應體系原材料，需明確名稱、來源（申請人自制/外購及生產商名稱）、基本信息（生物學來源，單克隆/多克隆，單克隆抗體克隆號，天然抗原/重組抗原及表達載體，擴增基因名稱,片段大小等）和質量標準。

對于除核心反應體系原材料之外的其他主要原材料，需明確名稱、基本信息和質量標準。

對于具有較高公共健康風險的產品，建議載明主要原材料的更多信息，具體請參考相關產品的指導原則。

如果產品技術要求性能指標、檢驗方法中涉及采用企業參考品進行試驗，則需將企業參考品的設置情況（組成、樣本類型、陰陽性、濃度要求等）在技術要求附錄主要原材料中簡述。

三、參考文獻

[1] 國家市場監督管理總局.體外診斷試劑注冊與備案管理辦法:國家市場監督管理總局令第48號[Z].

[2] 國家藥品監督管理局.關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告:國家藥品監督管理局公告2021年第122號[Z].

[3] GB/T 29791.1-2013，體外診斷醫療器械制造商提供的信息（標示）第1部分：術語、定義和通用要求[S].