雌激素受體、孕激素受體抗體試劑及檢測試劑盒注冊審查指導原則（2025年修訂版）（2025年第4號）

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雌激素受體、孕激素受體抗體試劑
及檢測試劑盒注冊審查指導原則
（2025年修訂版）

本指導原則旨在指導注冊申請人對雌激素受體、孕激素受體抗體試劑及檢測試劑盒注冊申報資料的準備及撰寫，同時也為技術審評部門審評注冊申報資料提供參考。

本指導原則是對雌激素受體、孕激素受體抗體試劑及檢測試劑盒的一般要求，申請人應依據產品的具體特性確定其中內容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應的科學依據，并依據產品的具體特性對注冊申報資料的內容進行充實和細化。

本指導原則是供注冊申請人和技術審評人員使用的指導性文件，但不包括審評審批所涉及的行政事項，亦不作為法規強制執行，應在遵循相關法規的前提下使用本指導原則。如果有能夠滿足相關法規要求的其他方法，也可以采用，但是需要提供詳細的研究資料和驗證資料。

本指導原則是在現行法規和標準體系以及當前認知水平下制定的，隨著法規、標準的不斷完善和科學技術的不斷發展，本指導原則相關內容也將適時進行調整。

一、適用范圍

雌激素受體（Estrogen Receptor，ER）、孕激素受體（Progesterone Receptor，PR）抗體試劑及檢測試劑盒是指利用免疫組織化學法，對病理組織學或細胞學樣本切片中雌激素受體或孕激素受體進行檢測的試劑。此類試劑為特異性單克隆或多克隆抗體，或抗體與顯色系統、對照試劑、質控片（如有）及其它輔助試劑一同包裝成試劑盒形式的檢測試劑，主要用于乳腺癌患者的預后判斷和指導用藥。ER有兩種亞型, 分別是ERα和ERβ，兩者結構相似，但在組織分布及生物學功能上不盡相同。本指導原則所提及ER為ERα。為更好區分不同陽性腫瘤細胞百分比及不同染色強度，本指導原則采用表達水平表示不同ERα陽性腫瘤細胞百分比（如1-10%陽性腫瘤細胞為低表達），用強中弱等表示不同染色強度（如1-10%陽性細胞可以是弱染色強度，也可以是強染色強度）。

本指導原則僅包括雌激素受體、孕激素受體抗體試劑及檢測試劑盒注冊申報資料中部分項目的要求，適用于進行產品注冊和相關變更注冊的產品。其他未盡事宜（包括產品風險分析資料等），應當符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（以下簡稱《辦法》）、《關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》等相關法規要求，同時建議參考其他適用的技術文件。

二、注冊審查要點

（一）監管信息

1.產品名稱及分類編碼

產品名稱應符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》及相關法規的要求，單獨的第一抗體試劑通用名稱建議采用以下命名方式：待測抗原特異性抗體+試劑（免疫組織化學法），如：雌激素受體抗體試劑（免疫組織化學法）?？贵w與顯色系統、對照試劑、質控片及其它輔助試劑一同包裝的檢測試劑盒通用名稱建議采用以下命名方式：待測抗原+檢測試劑盒（免疫組織化學法），如：孕激素受體檢測試劑盒（免疫組織化學法）。按照《體外診斷試劑分類規則》，該產品按照第三類體外診斷試劑管理，分類編碼為6840。

2.注冊申請人還需提交產品列表、關聯文件、申報前與監管機構的聯系情況和溝通記錄及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

內容應符合《醫療器械監督管理條例》和《關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》的相關要求，主要包括概述、產品描述、預期用途、申報產品上市歷史及其他需說明的內容。建議申請人著重介紹以下幾方面內容：

1.產品描述中應詳述檢測原理、雌激素/孕激素受體生物學特性，包括受體的基本結構和信號轉導途徑，組織分布與功能；產品主要研究結果的總結和評價、與同類和/或前代產品的比較等。

2.描述產品與疾病和治療的關系，以文獻的形式闡述ER/PR檢測的臨床意義。

3.建議以列表的方式進行與同類和/或前代產品的比較分析，比較境內外已批準上市試劑和注冊申報產品的抗體克隆號、抗體性質（如單克隆抗體，IgG1型）、適用的腫瘤組織類型、預期用途、顯色系統選擇、試驗方法和樣本處理、判讀方式、產品主要性能等方面的主要區別。

4.明確與申報產品配套使用的試劑、儀器、軟件等信息，包括生產企業名稱、產品名稱、儀器型號、軟件名稱及完整版本號，在檢測中發揮的作用，必要時可提交相應說明書。如已獲批準，提交注冊證編號和國家藥監局官方網站公布的注冊證信息。

（三）非臨床資料

1.產品技術要求及檢驗報告

產品技術要求應主要包括以下性能指標：外觀、符合性、批內重復性、批間重復性等。其中“符合性”和“重復性”指標，應明確采用包含不同表達水平（至少包括陰性、1%-10%低表達、以及大于10%的不同表達程度陽性樣本）的乳腺癌組織類型組織片進行檢測。申報試劑如有適用的國家標準、行業標準，則產品技術要求不得低于上述標準要求。另外，產品技術要求中應以附錄形式明確主要原材料及生產工藝的要求。

按照《醫療器械產品技術要求編寫指導原則》的要求編寫產品技術要求，并提交三個不同批次符合產品技術要求的全項目檢驗報告，檢驗可以委托有資質的醫療器械檢測機構進行或自檢。提交資料應符合《關于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告（2021年第122號）》《醫療器械自檢管理規定》（如適用）等相關文件的要求。

2.分析性能研究

注冊申請人應當在原材料和生產工藝經過選擇和確認、質量管理體系得到有效控制并且保證產品質量穩定的基礎上，采用完整、確定的檢測系統進行分析性能評估，包括具體研究方法、試驗方案、質控標準、試驗數據、統計分析等詳細資料。對于適用多個機型的產品，應提供所有適用機型的性能評估資料。若試劑盒適用多種樣本類型，則需對所有樣本類型的適用性進行評估，并提交研究資料。如申報產品適用于手動和自動過程，需分別對手動和自動操作的性能進行研究。

分析性能評估所用樣本的基本信息均需明確，例如樣本類型、組織類型、組織/細胞片的制備與稀釋方式（如適用）、表達水平及確定方法等。分析性能評估用樣本應為組織切片、組織芯片或細胞系切片，應提供商業化組織芯片相關信息。

對于本類產品建議著重對以下分析性能進行研究：

2.1樣本穩定性

樣本穩定性研究至少包括適用的組織類型、組織/細胞切片在不同儲存條件下的實時穩定性研究。研究樣本應包含陰性樣本及不同染色強度（染色強、中、弱）和陽性腫瘤細胞百分比的陽性樣本（至少包括1%-10%陽性樣本及大于10%的陽性樣本）。研究用切片的制備應采用與說明書一致的方法，如切片的保存溫度范圍覆蓋冷藏和室溫，應分別進行穩定性研究，明確具體溫度條件，其中室溫研究應在聲稱的最高溫度條件下進行。如切片可在染色前或染色后儲存，需分別對染色前和染色后的穩定性進行研究。

申請人可通過提交文獻或進行實時穩定性研究的方式，支持說明書中蠟塊穩定性的聲稱。

2.2適用的樣本類型

明確適用的病理組織學或細胞學樣本要求。

2.3準確度：采用申報試劑與診斷準確度標準或已上市產品，同時檢測臨床樣本，比較檢測結果（包括染色強度和陽性腫瘤百分比）之間的一致性程度，進行申報試劑的準確度評價。

2.4免疫反應性

2.4.1正常組織：對30種正常人體組織（見表1），每種組織類型不少于3例，進行特異性評價，同時對著色位置及染色特點進行描述。

2.4.2非正常組織：對相關良性、惡性病變組織（見表2）進行特異性評價，每種組織類型不少于3例。如有采用申報產品為試驗材料進行研究的相關文獻資料，也可提交文獻資料驗證抗體試劑或檢測試劑盒與非正常組織的免疫反應性。

可選擇經充分驗證的組織芯片或經10%中性緩沖福爾馬林固定石蠟包埋的組織切片進行免疫反應性研究。應明確樣本組織類型的確定方法，應提供商業化組織芯片相關信息。

2.5特異性

ER抗體試劑或ER抗體檢測試劑盒應對ERβ的交叉反應進行評價?？衫肊Rα和ERβ的分子量差異，采用免疫印記法或利用免疫組織化學方法對ERβ高表達、ERα不表達的組織樣本進行免疫反應性研究，驗證抗體的特異性。也可利用其它合理的方法進行交叉反應研究。提交其他結構類似物的交叉反應研究資料。

2.6精密度

2.6.1檢測內精密度：對連續切片的乳腺癌樣本，進行檢測重復性研究。包括染色強度、陽性細胞百分比及著色位置。

2.6.2檢測間精密度：對可能影響檢測精密度的主要變量進行驗證，包括不同批次間（不少于3批次）、不同儀器間、日間、操作者間和閱片者間。兩次閱片者之間應設置合理的遺忘期。

2.6.3建議對不同染色強度、不同陽性細胞百分比及ER/PR陰性的乳腺癌樣本進行包含染色位置、染色強度和陽性細胞百分比數的精密度研究，至少包括ER/PR陰性樣本、1%-10%陽性腫瘤細胞百分比的低表達陽性樣本和大于10%陽性腫瘤細胞百分比的陽性樣本。研究數據應采用合理的統計方法和95%雙側置信區間，制定適當的接受標準。

2.7靈敏度

建議申請人對不少于5例ER/PR低表達樣本（1%~10%陽性腫瘤細胞）進行靈敏度評價。

2.8 企業參考品（陰陽性對照組織/細胞）驗證

提供企業參考品驗證資料，根據主要原材料研究資料中的企業參考品設置情況，采用三批產品對企業參考品進行檢驗并提供詳細的試驗數據。

2.9參加國內外質控機構的質控活動情況

建議企業積極參加國內（國家病理質控評價中心PQCC）、國際質控機構（如：北歐免疫組化學質量控制機構（Nordi immunohistochemical QualityControl，NordiQC）、英國國家外部質量評估計劃（UK National External Quality Assessment Schemes, UK NEQUAS）、美國病理學會（College of American Pathologists, CAP）等）的質控活動，并提交質控結果報告。

2.10反應體系

2.10.1產品基本反應原理介紹。

2.10.2樣本采集和處理

明確樣本的取材、固定、包埋、切片的具體要求，包括但不限于可檢測標本的類型、固定液的選擇、組織塊的厚度要求、樣本離體后開始固定的時間，樣本固定時間、溫度要求、包埋條件等。提供樣本處理的方法、步驟及參考文獻。上述條件要求可引用規范性操作手冊，也可通過研究確定。建議申請人對切片厚度、載玻片的要求進行研究，確定適用的切片厚度范圍和載玻片類型。

2.10.3詳述抗原修復方法的確定依據。

詳述抗原修復方法和參數條件，包括方法、時間、溫度、pH值的確定依據。如抗原修復液可重復使用，應提交重復使用次數限定的研究資料。

2.10.4最適抗體滴度和抗體孵育時間確定的研究。

2.10.5檢測體系反應條件的確定

申請人應考慮脫蠟水化、酶阻斷、抗體孵育、顯色、復染等各個步驟對產品性能的影響，通過試驗確定上述條件的最佳組合。常規免疫組織化學檢測步驟的確定，可引用行業和企業內部規范性操作手冊或文獻，但應對確定后的檢測步驟進行性能驗證。

2.10.6質量控制

申報產品應建立完整有效的質控方法。提供內、外對照陽性陰性質控染色及待測樣本的陰性對照試劑的染色要求，外對照明確推薦質控片的細胞/組織類型和制備方法、提交染色結果可接受的標準及其確定的研究資料。提供內對照的細胞類型、染色結果可接受標準及其確定資料。

3.穩定性研究資料

申報試劑的穩定性主要包括實時穩定性、運輸穩定性、開瓶穩定性、機載穩定性（如適用）和稀釋穩定性（如適用）研究。申請人可根據實際需要選擇合理的穩定性研究方案。穩定性研究資料應包括研究方法的確定依據、具體的實施方案、詳細的研究數據以及結論。對于實時穩定性研究，應提供至少3批樣品在實際儲存條件下保存至成品有效期后的研究資料。對于開瓶穩定性研究應模擬真實使用情形，包括開瓶穩定性的開瓶頻次和開瓶時間等。

4.陽性判斷值研究資料

提交最新的國際、國內診療指南等相關文獻資料，根據指南明確陽性判斷值并提交驗證資料。提交染色特點的研究資料，包括陽性樣本著色顏色、染色部位、背景信息及不同強度陽性組織的染色特點，并附典型免疫組化圖。

5.其他資料

5.1主要原材料研究資料

此產品的主要原材料主要包括第一抗體、顯色系統、封閉液、同型對照抗體、質控片、企業內部參考品等，應提供主要原材料的選擇與來源、制備過程、質量控制標準等相關研究資料。注冊人應根據產品注冊單元的實際情況，遞交相應原材料資料。如主要原材料為企業自制，應提供其詳細制備過程；如主要原材料源于外購，應提供資料包括：選擇該原材料的依據及對比篩選試驗資料、 供應商提供的質量標準、出廠檢驗報告，以及該原材料到貨后的質量檢驗資料，供應商應固定，不得隨意更換。

5.1.1第一抗體的詳細研究資料。

5.1.1.1詳細的抗體性質鑒定資料，包括：抗體的特異性、親和常數及效價、抗體的類型及亞型、抗體蛋白濃度、純度的驗證。對于企業自制抗體，還應提供抗體識別位點的驗證。申請人可通過放射性免疫分析法、雙向瓊脂擴散法、酶聯免疫吸附法、免疫印跡法、凝膠電泳等方法進行研究。明確抗體的克隆號、種屬來源、抗體制備形式等信息。

5.1.1.2第一抗體的克隆選擇、制備、純化等詳細試驗資料,包括以下兩種情況：

5.1.1.2.1企業自制抗體

5.1.1.2.1.1詳述抗體克隆的選擇依據，可提交文獻資料或克隆選擇的試驗研究資料；

5.1.1.2.1.2明確免疫原和抗原的性質。

5.1.1.2.2企業外購抗體

5.1.1.2.2.1詳述抗體克隆的選擇依據，可提交文獻資料或克隆選擇的試驗研究資料（建議企業選擇已經臨床充分驗證的克隆作為第一抗體）；

5.1.1.2.2.2明確免疫原、抗原的性質及外購方名稱；

5.1.1.2.2.3提交外購方出具的抗體性能指標及檢驗證書，詳述申請人對該抗體技術指標的要求和申請人確定該抗體作為主要原材料的依據。

5.1.2酶標第二抗體系統（如適用）的選擇及驗證資料。

檢測試劑盒中的第二抗體系統如為外購，應詳述酶標第二抗體系統的確定依據，明確外購方名稱，提交外購方出具的質量檢驗報告以及申請人出具的入廠檢驗報告，詳述申請人對酶標第二抗體系統相關主要原材料的技術指標；如為自制，詳述自制所需原料、自制過程及工藝穩定性驗證報告以及質量標準。

5.1.3陰性對照試劑。

詳述為評估非特異性染色而采用的用于取代一抗的陰性對照試劑的組成成分、稀釋液成分等，如為外購，需明確生產企業名稱、產品名稱、注冊證號或備案編號、貨號。建議使用同型對照抗體，需明確種屬來源、抗體亞型、濃度、純度等信息。

5.1.4染色對照的研究資料。

每批ER、PR免疫組織化學染色都應當設立陽性對照和陰性對照。外對照可以選擇已知明確的呈現陰性和陽性表達的細胞株、子宮內膜組織或已知陰性和陽性的乳腺癌組織。詳述陰、陽性對照的組成，包括組織類型、例數、強度和陽性細胞百分比。應提供對質控片組織或細胞類型和ER/PR表達情況（包括陽性細胞百分比和染色強度）的確定依據及染色接受標準確定資料。建議采用臨床上普遍認為質量較好的同類試劑進行確認。建議設置低表達質控品（腫瘤細胞比例在1%-10%，如適用），以便更加靈敏的監控試驗過程中可能出現的錯誤結果。

5.1.5封閉液的研究資料。

封閉液應能夠封閉非特異結合、內源性酶活性或內源性生物素等。如不包含封閉液，需說明解決非特異結合及干擾的措施、原理、方法，并提交驗證資料。

5.1.6其他主要原輔料的選擇及驗證資料，如牛血清白蛋白、抗原修復液、抗菌劑等。

該類主要原輔料如為外購，應說明有生物活性的原輔料的外購方名稱，提交外購方出具的檢驗證書，詳述申請人對每一原輔料的質量要求；如為自制，詳述自制過程。

5.1.7企業內部參考品

詳述企業內部參考品（內部質控片）的組成，包括組織類型、例數、染色特征和染色強度。應提供對內部質控片組織類型、染色特征和染色強度的確定依據，建議采用臨床上普遍認為質量較好的同類試劑進行確認。

5.2生產工藝研究資料

5.2.1主要生產工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡要說明主要生產工藝的確定依據。

5.2.2第一抗體制備的詳細研究資料（如適用）。

5.2.3 如包括其他酶標二抗、顯色系統、對照試劑、質控片（如有）及其它輔助試劑，則詳述其生產工藝確定的研究資料。

（四）臨床試驗

1.臨床試驗機構的選擇

申請人應當選定不少于3家（含3家）臨床試驗機構開展臨床試驗。臨床試驗機構應當具備相應條件，且已按照規定進行醫療器械臨床試驗機構備案。盡量使各臨床試驗機構的臨床樣本有一定的區域代表性。臨床試驗機構應當具有嚴格的質量管理體系，執行實驗室內部日常質量控制，參加國內病理以及國際病理質控機構的質控活動。

2.病例選擇和樣本類型

臨床試驗應當選擇已確診為乳腺癌的患者。應當以浸潤性乳腺癌為主，包括臨床常見的乳腺癌病例組織類型。

臨床常用樣本類型為經10%中性緩沖福爾馬林固定石蠟包埋乳腺癌組織樣本。

3.試驗方法

3.1選擇已批準上市，臨床普遍認為質量較好，如該抗體克隆經過國際權威機構（如NordiQC等）年度評分成績較好的已上市同類產品，作為對比試劑。采用試驗體外診斷試劑與之進行比較研究，證明本品與已上市產品等效。

3.2產品設計包括多種適用情形時，如適用于不同的樣本類型（如：冰凍樣本）、不同檢測體系（如：配合適用的第二抗體、顯色劑）、或包括不同的抗體試劑類型（如：濃縮型與即用型）等，臨床試驗應當以一種適用情形為主，同時對其他適用情形進行一定數量與對比方法的對比試驗或同源對比試驗，應當滿足統計學要求。

3.3對于預期用途中已明確配合具體治療藥物名稱的ER、PR檢測試劑，應當采用聯合藥物評價臨床試驗的形式，同時評價檢測結果與接受治療后臨床預后的相關性和試驗體外診斷試劑與對比試劑檢測的一致性。

4.臨床評價指標和樣本量考慮

4.1臨床評價指標

對于半定量產品的臨床評價指標包括：各等級符合率、陰/陽性符合率及Kappa值等。此外，用試驗體外診斷試劑及對比試劑陽性細胞百分比做散點圖的方法，配合適當的統計分析方法，如Pearson相關分析等，計算相關系數，評價試驗用體外診斷試劑與對比試劑在陽性細胞百分比上的檢測一致性。

此外，應當評價試驗體外診斷試劑與對比試劑染色強度的一致性。

4.2樣本量考慮

臨床試驗入組樣本應當覆蓋產品檢測范圍，各個等級均應當有一定例數，特別對于陽性百分比1%-10%弱陽性樣本，應當入組一定例數的樣本。陽性符合率和陰性符合率計算時P0建議分別不低于90%和95%。

臨床試驗樣本量應當以臨床性能得到充分評價為目標，保證目標人群的各種特征均有充分數量的代表性受試者入組，應當結合產品的具體特點、統計學分析模型等因素選擇適當的樣本量估算方法，并在方案中明確樣本量確定的依據。同時應當充分考慮可能的脫落剔除率等情況，合理設定樣本量要求。

5.統計學分析

對臨床試驗結果的統計應當選擇合適的統計方法，對于本類檢測試劑比較研究試驗的一致性研究，常選擇R×C表的形式總結兩種試劑的半定量檢測結果，計算各等級符合率、陰性符合率、總符合率和Kappa值等指標，并選擇合適的統計學方法計算95%置信區間。

用試驗體外診斷試劑及對比試劑陽性細胞百分比做散點圖的方法，配合適當的統計分析方法，如Pearson相關分析等，計算相關系數，評價試驗用體外診斷試劑與對比試劑在陽性細胞百分比上的檢測一致性。

對于本類檢測試劑與對比試劑染色強度的一致性研究，結果應當采用R×C列聯表的形式給出，并計算不同染色強度的符合率、總符合率、Kappa值等指標，并選擇合適的統計學方法計算95%可信區間。

6.結果差異樣本的驗證

在數據收集過程中，對兩種試劑檢測結果不一致的樣本，建議采用其他合理的方法進行復核，同時對切片的染色特點及差異產生原因進行分析。

7.質量控制

由于免疫組化試驗前處理步驟較多，導致判讀結果可能會在試驗人員間、實驗室間產生差異。為了客觀單一評價試劑性能，盡量減少這種人為差異對最終結果造成的影響，臨床試驗開始前，各臨床試驗機構應當進行判讀一致性試驗及統一的質量控制，統一操作步驟，確保同樣的染色片在不同醫院的判讀結果保持一致。該預評估內容、實現方法、結果等應當在臨床試驗報告中體現。

8.原始數據

8.1提交病例報告表（Case Report Form, CRF），內容應當至少包括：性別、年齡、病理診斷結果、試驗體外診斷試劑檢測陽性細胞百分比和染色強度、對比試劑檢測陽性細胞百分比和染色強度。陽性細胞百分比可取整到每10%為一個等級，<10%的應當盡量細化。

8.2提交入選樣本染色代表性彩色圖片，并對染色特點包括組織形態、染色強度和背景染色特點進行簡要評述。

9.臨床試驗方案

體外診斷試劑臨床試驗應當按照同一臨床試驗方案在多家臨床試驗機構開展，且保證在整個臨床試驗過程中遵循預定的方案，不可隨意改動。整個試驗過程應當在臨床試驗機構的實驗室內并由該實驗室的技術人員操作完成，申報單位的技術人員除進行必要的技術指導外，不得隨意干涉試驗進程。

試驗方案應當確定嚴格的入選/排除標準，任何已入選的樣本被排除出臨床試驗都應當記錄在案并明確說明原因。在試驗操作過程和結果判定時，應當采用盲法以保證試驗結果的客觀性。各臨床試驗機構選用的對比方法應當保持一致，以便進行合理的統計學分析。

應當以圖表的形式對試驗總體設計及工作流程進行描述。圖表中應當包括連續切片的數量及用途分配等。

試驗方案中應當明確閱片者、操作者的選擇標準。閱片者應當選擇在免疫組織化學和乳腺癌病理診斷中有豐富經驗的病理科醫生。

臨床試驗前申請人應當對臨床試驗機構參與人員進行相關技術培訓，并采用統一判讀標準等手段，保持各臨床試驗機構的判讀一致性。

在整個試驗中，試驗用體外診斷試劑和對比試劑都應當處于有效的質量控制下，最大限度保證試驗數據的準確性及可重復性。臨床試驗研究方案中應當明確內部質控的方法及配合用陰性質控試劑的詳細信息。

10.臨床試驗小結和報告

根據《體外診斷試劑臨床試驗技術指導原則》的要求，臨床試驗報告應當對試驗的整體設計及各個關鍵點給予清晰、完整的闡述，應當對整個臨床試驗實施過程、結果分析、結論等進行條理分明的描述，并應當包括必要的基礎數據和統計分析方法。

（五）產品說明書和標簽樣稿

產品說明書的格式應符合《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》的要求。產品說明書中相關技術內容應與注冊申報資料中的相關研究結果保持一致，如某些內容引用自參考文獻，則應以規范格式對此內容進行標注，并單獨列明文獻的相關信息。

雌激素受體、孕激素受體抗體試劑及檢測試劑盒（免疫組織化學法）說明書編寫應重點關注以下內容。

1．【預期用途】

應至少包括以下內容：

1.1試劑盒用于體外半定量和/或定性檢測經10%中性緩沖福爾馬林固定石蠟包埋和/或冰凍組織切片中雌激素受體/孕激素受體。

1.2用于乳腺癌的預后判斷與指導用藥（注：建議采用陽性細胞百分比數和染色強度的半定量形式出具報告。）

1.3ER/PR陽性表達于細胞核內。

1.4介紹特異性結合位點。

1.5簡單介紹ER/PR的生物學特征，如基本結構和信號轉導途徑。

1.6簡單介紹ER/PR在乳腺癌預后判斷、用藥指導中的作用。

1.7如未進行與藥物聯合評價臨床試驗，則不應涉及具體藥物產品（商品）名稱、生產企業信息等，并注明該產品未與具體藥物聯合進行臨床評價。

1.8明確說明對任何陽性或陰性結果的解讀，應由病理科醫生結合病理形態學、臨床表現及其它檢測方法進行，不作為單獨的診斷指標。

2.【檢測原理】

簡述免疫組織化學的基本原理，并對申報試劑的抗原修復方法、第一抗體、放大系統、顯色系統及結果觀察等進行簡要介紹。

3.【主要組成成分】

3.1說明試劑盒包含組分的名稱、數量、裝量、比例或濃度等信息；質控片（如有）的組織名稱。

3.2對檢測中使用的抗體信息進行簡單介紹，包括抗體的克隆性質（單克隆或多克?。?、抗體的類型（如IgG1)、抗體的種屬性、克隆號、抗體制備形式（如細胞培養上清液）、免疫原。

3.3試劑盒中不包含但對該項檢測必需的組份，如單獨注冊的質控片、放大系統、顯色系統等，企業應列出相關試劑的產品名稱、注冊人（備案人）、貨號及其注冊證編號（備案編號）等其他相關信息。

3.4需要但未提供的軟件

若有配合使用的單獨注冊的軟件，列明軟件名稱、發布版本號、注冊人、注冊證號等信息。如配合使用試劑或軟件正在進行注冊（備案），注冊證編號（備案編號）可先留空，在完成注冊（備案）后由注冊人（備案人）自行添加相應文號。

4.【儲存條件及有效期】

對試劑的儲存條件、有效期、開封穩定性、機載穩定性、運輸穩定性和凍融次數限制（如適用）等信息做詳細介紹。

5.【適用儀器】

說明適用的儀器及其型號，并提供與儀器有關的信息以便用戶能夠正確選擇使用。

6.【樣本要求】

重點明確以下內容：

6.1應明確對適用樣本的取材、固定、包埋的具體要求。此部分內容可參考《美國臨床腫瘤學會和美國病理學家學會乳腺癌雌激素/ 孕激素受體免疫組化檢測指南》或國內相關標準操作性文件內容進行編寫或引用。

6.2明確樣本的穩定性。

7.【檢測方法】

詳細說明操作的各個步驟：

7.1明確檢測需要的儀器、設備。如預處理儀、染色儀等。注明貨號及生產商。

7.2試劑配制方法、注意事項，試劑開封、配制后使用方法及注意事項等。

7.3手工操作應詳述脫蠟和水化、組織抗原修復、第一抗體孵育、顯色等各操作步驟。描述應盡量細化，需明確各步驟處理時間及pH值等內容。如第一抗體為濃縮型抗體，還需明確抗體工作液的濃度及稀釋液的詳細信息。

7.4質量控制：明確每一批次檢測樣本均應同時進行內、外陽性/陰性質控染色及陰性對照試劑染色的要求。質控應包含從強陽性到陰性不同ER/PR濃度水平的細胞系細胞或不同ER/PR表達水平（染色強度）的乳腺癌組織切片，其中應包括至少一個中等陽性強度質控或弱陽性乳腺癌組織切片。為用戶提供可作為陽性和陰性，內、外對照的細胞/組織名稱。詳述質控片制備的要求及質控結果的要求（試驗有效性的判斷），以及質控結果不符合要求的處理方式。

8.【陽性判斷值】（如適用）

根據相關指南及規范性文件，以陽性百分比的形式明確判讀參考值并附典型免疫組化圖。

明確需要重復檢測的情況及參考指南。

9.【檢驗結果的解釋】

配合彩色圖片對結果判讀進行說明，彩色圖片應至少包含不同級別陽性及陰性質控片（如適用）的結果圖例。

明確陽性為細胞核著色，其它部位著色為非特異染色。明確顯色劑名稱及顯示顏色。

對可能出現的假陰性、假陽性情況進行說明，并明確提出出現該情況后的處理方法。

對無法判讀的情形進行詳細說明。

10.【檢驗方法的局限性】

綜合產品的預期用途、臨床背景、檢測方法及適用范圍等信息，對可能出現的局限性進行相關說明，主要包括以下描述，請申請人選擇適用的條款在產品說明書中予以闡述。

10.1免疫組織化學檢測是一種需通過多個檢測步驟完成的診斷過程。在試劑的選擇、取材、固定、處理、切片的制備和染色結果的解釋上需要進行專門的培訓。

10.2任何陽性或陰性結果的解讀，應由病理科醫生結合病理形態學、臨床表現及其它檢測方法進行，不作為單獨的診斷指標。

10.3復染過度或不足都可能影響結果的判讀。

10.4不恰當的染色前組織的處理過程直接影響染色效果，造成假陽性、抗體定位不準確或假陰性結果。結果不一致可能是由樣本固定和包埋方法不同或組織樣本內固有差異造成的。

10.5陰性結果表示未檢出抗原，不一定表示樣本中無該抗原存在。待測抗原編碼基因變異、抗原低表達或抗原修復不當等，都會造成抗原無法檢出。

10.6本試劑僅對經10%中性緩沖福爾馬林固定石蠟包埋的組織進行了驗證（如適用），不得用于其它樣本類型或流式細胞檢測等其它用途。

11.【產品性能指標】

詳述免疫反應性、精密度、特異性、靈敏度等各項性能指標和臨床試驗數據總結，列明研究方法和研究結果。詳述以下性能指標：

11.1免疫反應性：詳述正常組織，相關良、惡性病變組織中的免疫反應性。包括染色位置及染色特點。

11.2精密度：詳述檢測內精密度及不同批次間（不少于3批次）、不同儀器間、日間、操作者間和閱片者間的檢測間精密度。簡述不同機型、不同樣本類型的精密度評價方法和結果。(包括重復性、中間精密度和再現性評價結果)

11.3特異性:詳述特異性結果。

11.4靈敏度:詳述染色強度及陽性腫瘤細胞百分比靈敏度結果。

11.5臨床試驗數據總結。

12.【注意事項】

應至少包括以下內容：

12.1有關試劑盒內人源組份（如有）生物安全性的警告。

12.2有關試驗操作中涉及試劑的安全性提示，包括對有毒有害物質的防護及危險物品的處理方法等。

（六）質量管理體系文件

按照《體外診斷試劑注冊申報資料要求及說明》提交相應的質量管理體文件，列出申報產品關鍵成分或原材料的生產、關鍵工藝過程、滅菌等資料的要求。

三、參考文獻

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